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植物亮氨酸肽酶ELISA试剂盒是一种基于免疫学反应的试验技术,它将抗原和抗体的特反应与酶的催化作用相结合。ELISA 试剂盒主要用于检测特定抗原或抗体在样本中的含量或活性。
植物亮氨酸肽酶ELISA试剂盒操作步骤:
1. 准备试剂:ELISA 试剂盒中包含以下组分:已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)、酶标记的抗原或抗体(结合物)、酶的底物、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)、参考标准品和控制血清(定量测定中)、结合物及标本的稀释液、洗涤液和酶反应终止液。
2. 包被:用包被缓冲液将抗原或抗体稀释至适当浓度,然后在每个聚苯板的反应孔中加入 0.1ml,4℃过夜。
3. 洗涤:弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液清洗反应孔,重复 3 次,每次 3 分钟。
4. 加样:将待检样品和阴性对照品、阳性对照品按一定稀释度加入已包被的反应孔中,37℃孵育 1 小时。
5. 洗涤:再次清洗反应孔。
6. 加酶标记物:将酶标记的抗原或抗体加入反应孔中,37℃孵育 1 小时。
7. 洗涤:清洗反应孔。
8. 加底物:每个反应孔中加入适量的酶底物,37℃孵育 10-30 分钟。
9. 终止反应:加入终止液,终止酶促反应。
10. 读数:用酶标仪检测各反应孔的吸光度值,根据标准曲线计算待测样品的浓度。

通过上述步骤,可以实现对特定抗原或抗体的高灵敏度检测。

注意事项
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

植物亮氨酸肽酶ELISA试剂盒
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